Онкоцитология: что это, сферы применения, гинекологический мазок на цитологию

Почему-то все думают, что онкоцитология касается исключительно женской половой сферы (шейка матки, цервикальный канал). Наверное, это происходит потому, что состояние шейки матки является предметом повседневного изучения любого врача-цитолога, тогда как мазок на онкоцитологию можно нанести на стекло после соскоба или тонкоигольной аспирационной биопсии (ТАБ) из других мест. Кроме этого, можно сделать мазки-отпечатки слизистой гортани, носоглотки, кожи (меланома), мягких тканей. В принципе, при подозрении на онкологический процесс материал на исследование можно получить из любого места, правда, разными методами. Например, с помощью тонкоигольной аспирационной биопсии. Чаще всего так поступают, если есть сомнения в отношении здоровья молочной или щитовидной железы, где цитологическая диагностика играет главную роль, ведь гистологическая верификация предусмотрена только во время оперативного вмешательства (срочная гистология) и после удаления органа.

Онкоцитология

Онкоцитология подразумевает микроскопический анализ (изучение клеточного состава и состояния органоидов клеток) материала, подозрительного в отношении онкологического процесса и взятого из любого доступного места.

В связи с этим, пациентов не должны удивлять мазки на онкоцитологию, приготовленные не только из соскобов женских половых органов, но и тонкоигольная аспирационная биопсия (ТАБ):

• Увеличенных регионарных лимфоузлов (рак гортани, полостей носа и придаточных пазух, слюнных желез, рак полового члена, опухоли глаза и др.);
• Опухоли поджелудочной железы, печени, желчного пузыря и внепеченочных желчных протоков;
• Уплотнений и узлов молочной и щитовидной желез.

Выявление и установление диагноза злокачественного новообразования мягких тканей, кожи, губы, слизистых полости рта и носа, рака прямой или ободочной кишки, опухолей костей нередко начинается с исследования мазков-отпечатков. А затем добавляется ТАБ измененных лимфоузлов и/или гистологическая диагностика (гистология). Например, при подозрении на опухоли прямой или ободочной кишки цитология является первым этапом диагностики, но никак не сможет заменить гистологию.

Следует отметить, что некоторые органы не подвергаются гистологическому анализу вплоть до операции, ведь нельзя отрезать кусочек ткани в молочной или щитовидной железе и отправить на исследование. В подобных случаях – основная надежда на цитологию и здесь важно не ошибиться и не создать риск удаления органа, который можно было спасти другими методами.

Мазок на онкоцитологию при профилактическом гинекологическом осмотре или с целью выявления онкологической патологии (плоскоклеточный рак вульвы, шейки матки и влагалища) забирает врач-гинеколог или акушерка, наносит на предметное стекло и передает его в цитологическую лабораторию для окрашивания (по Романовскому-Гимзе, Паппенгейму, Папаниколау) и исследования. На подготовку препарата уйдет не больше часа (мазок для начала нужно высушить, а потом красить). Просмотр также займет не больше времени, если препараты качественные. Словом, для цитологии нужны стекла, подготовленная заранее краска, иммерсионное масло, хороший микроскоп, глаза и знания врача.

Анализ производит врач-цитолог, но в иных случаях мазки при проведении скрининга после профосмотров, доверяются опытному лаборанту, который хорошо знаком с вариантами нормы (норма – цитограмма без особенностей). Однако малейшее сомнение является основанием для передачи мазка врачу, который и примет окончательное решение (направит к специалисту, предложит гистологическое исследование, если это возможно). К гинекологическим мазкам на онкоцитологию мы вернемся несколько ниже, а пока хочется познакомить читателя, что такое онкоцитология вообще и чем она отличается от гистологии.

Цитология и гистология – одна наука или разные?

В чем же разница между цитологией и гистологией? Этот вопрос  хочется поднять в связи с тем, что многие люди немедицинских профессий не видят различий между этими двумя направлениями и считают цитологическую диагностику разделом, входящим в гистологический анализ.

Цитограмма показывает строение и состояние клетки и ее органоидов. Клиническая цитология (и ее важная ветвь – онкоцитология) представляет собой один из разделов клинической лабораторной диагностики, направленный на поиск патологических процессов, в том числе, и опухолевых, меняющих состояние клеток. Для оценки цитологического препарата существует специальная схема, которой придерживается врач:

• Фон мазка;
• Оценка состояния клеток и цитоплазмы;
• Расчет ядерно-плазматического индекса (ЯЦИ);
• Состояние ядра (форма, размер, состояние ядерной мембраны и хроматина, наличие и характеристика ядрышек);
• Наличие митозов и высота митотической активности.

Цитология бывает двух видов:

1. Простое цитологическое исследование, включающее взятие мазка, нанесение его на предметное стекло, высушивание и окрашивание по Романовскому, Паппенгейму или Папаниколау (зависит от красителей и методов, используемых лабораторией) и просмотр мазка под микроскопом сначала при малом (х400), а потом при большом увеличении (х1000) с иммерсией;
2. Жидкостная онкоцитология, открывающая новые перспективы, позволяющая врачу наиболее точно определить состояние клетки, ее ядра и цитоплазмы. Жидкостная онкоцитология – это, прежде всего, применение современного высокотехнологичного оборудования (Cytospin) для выделения, равномерного распределения клеток на стекле, сохранения их структуры, что обеспечивает врачу легкую идентификацию клеточного материала после окрашивания микропрепаратов в специальных автоматических аппаратах. Жидкостная онкоцитология, несомненно, дает довольно высокую достоверность и точность результатов, однако заметно повышает себестоимость цитологического анализа.

Онкоцитологическую диагностику проводит врач-цитолог и, разумеется, для того чтобы все это увидеть, он применяет иммерсию и большое увеличение микроскопа, иначе изменения, происходящие в ядре заметить просто невозможно. Описывая мазок, устанавливая его тип (простой, воспалительный, реактивный) врач одновременно проводит расшифровку мазка. Ввиду того, что цитология носит больше описательный характер, нежели устанавливает точный диагноз, врач может позволить себе написать диагноз под знаком вопроса (в гистологии подобное не принято, патологоанатом дает однозначный ответ).

Что касается гистологии, то эта наука изучает ткани, которые при подготовке препаратов (биопсия, аутопсия)  рассекаются на тонкие слои с помощью специального оборудования – микротома.

Подготовка гистологического препарата (фиксация, проводка, заливка, резка, окрашивание) – процесс довольно трудоемкий, требующий не только высокой квалификации лаборанта, но и длительного времени. Гистологию (серию препаратов) «просматривают» врачи-патологоанатомы и устанавливают окончательный диагноз. В настоящее время на смену традиционной гистологии все чаще приходит новое, более прогрессивное направление – иммуногистохимия, которое расширяет возможности гистопатологического микроскопического изучения пораженных тканей.

Гинекологическая онкоцитология (шейки матки)

Взятие мазка при гинекологическом осмотре производится с помощью цитощетки, а затем материал помещают на стекло (для жидкостной онкоцитологии используется съемная цитощетка, которая вместе с материалом погружается во флакончик со специальной средой). Онкоцитология шейки матки, как правило, одним мазком (влагалищная порция шейки матки) не ограничивается, поскольку существует необходимость исследования эпителия шеечного (цервикального) канала. Это происходит потому, что самой проблемной областью в отношении онкологического процесса является зона стыка (зона трансформации) – место перехода многослойного плоского эпителия влагалищной части шейки матки (эктоцервикс) в однослойный призматический (цилиндрический) эпителий цервикального канала (эндоцервикс). Безусловно, «ляпать» оба мазка на одно стекло при диагностике  недопустимо (подобное возможно только при профосмотре), ведь они могут перемешаться и мазок окажется неадекватным.

В мазке  из шейки матки молодой здоровой женщины можно увидеть клетки поверхностного и промежуточного слоя (в различных соотношениях) неороговевающего четырехслойного плоского эпителия, растущего от базальной клетки, которая в норме находится глубоко и в мазок не попадает, а также клетки призматического эпителия шеечного канала.

Дифференцировка и созревание эпителиальных слоев происходит под влиянием половых гормонов (I фаза цикла – эстрогены, II фаза – прогестерон), поэтому мазки у здоровых женщин в разные фазы менструального цикла отличаются. Также они отличаются при беременности, в пред- и постменопаузе, после лучевого и химиотерапевтического воздействия. Например, наличие в мазке пожилой женщины более 10% поверхностных клеток заставляет насторожиться, ведь их появление, помимо воспаления, лейкоплакии, вагинального дерматоза, может свидетельствовать о развитии опухоли половых органов, молочной железы, надпочечников. Вот поэтому в направлении на мазок на онкоцитологию всегда указывается:

• Возраст женщины;
• Фаза цикла или срок беременности;
• Наличие внутриматочной спирали;
• Гинекологические операции (удаление матки, яичников);
• Лучевое и химиотерапевтическое лечение (реакция эпителия на данные виды лечебного воздействия).

При необходимости (если гормональный тип мазка не соответствует возрасту и клиническим данным) по вагинальным препаратам врач проводит гормональную оценку.

Вопросы цервикального канцерогенеза

Вирус папилломы человека

Вопросы цервикального канцерогенеза нередко связывают с проникновением в организм хронической резистентной инфекции типа вируса папилломы человека (ВПЧ) высокого риска. Вирус папилломы человека (ВПЧ) можно обнаружить только по косвенным признакам (койлоциты, многоядерные клетки, паракератоз) да и то, после того, как вирус активизировался, вышел из ядра базальной клетки переходной зоны  в ее цитоплазму и «переселился» в более поверхностные эпителиальные слои. Заключение «эпителий слизистой оболочки с признаками папилломовирусной инфекции» достойно особого внимания, ведь ВПЧ, до поры до времени «сидя тихо», может привести к развитию предракового, а затем и злокачественного процесса.

Таким образом, выявление и изучение данного ДНКового вируса весьма важно в онкоцитологии, поскольку он относится к факторам злокачественной трансформации клеток многослойного плоского эпителия в предрак шейки матки – дисплазию (CIN), неинвазивный рак in situ и, наконец, в инвазивные опухолевые заболевания.

К сожалению, в мазке на онкоцитологию у женщин без дисплазии, но с ВПЧ высокого риска, выявление опасного вируса не достигает и 10%. Правда, с дисплазией этот показатель увеличивается до 72%.

Следует отметить, что признаки ВПЧ-инфекции в мазке наиболее заметны при дисплазии легкой и умеренной степени, но практически не проявляются при тяжелой степени CIN, поэтому для идентификации вируса требуются другие методы исследования.

Дисплазия

Цитологический диагноз дисплазии (CIN I, II, III) или рак in situ уже считают плохой онкоцитологией (термин не совсем корректен, более правильно – «плохая цитограмма»).

Дисплазия – понятие морфологическое. Его сущность сводится к нарушению нормального напластования в многослойном плоском эпителии и выходу на разных уровнях пласта клеток типа базальных и парабазальных (клетки нижних слоев, не появляющиеся в мазке молодой здоровой женщины в норме) с характерными изменениями ядра и высокой митотической активностью.

В зависимости от глубины поражения различают слабую (CIN I), умеренную (CIN II), тяжелую (CIN III) степень дисплазии. От тяжелой дисплазии в мазке на онкоцитологию практически невозможно отличить преинвазивную форму рака (рак in situ).  Рак, который не покинул пределы базального слоя (cr in situ) бывает тяжело дифференцировать от CIN III и при гистологическом анализе, зато патологоанатом всегда видит инвазию, если она есть и фрагмент шейки, в котором она происходит, попал в препарат. При выявлении степени дисплазии врач-цитолог берет за основу следующие критерии:

• Слабую степень (CIN I) ставит в случае выявления в мазках молодой здоровой женщины 1/3 клеток базального типа при отсутствии признаков воспаления. Разумеется, слабая дисплазия в одночасье в злокачественную опухоль не перерастет, но у 10 % пациенток менее чем за 10 лет дойдет до тяжелой степени и у 1% трансформируется в инвазивный рак. Если все же имеют место признаки воспаления, то при расшифровке мазка врач отмечает: «Воспалительный тип мазка, дискариоз (изменения в ядре)»;
• Умеренную степень дисплазии (2/3 поля занято клетками базального слоя) следует отличать от цитологической картины в менопаузе (для исключения гипердиагностики CIN II), но с другой стороны выявление таких клеток с дискариозом в репродуктивном возрасте дает все основания поставить диагноз: CIN II или написать: «Найденные изменения соответствуют умеренной дисплазии». Такая дисплазия уже у 5% случаев перерастает в инвазивный рак;
• Онкоцитология шейки матки хорошо улавливает выраженную (тяжелую) степень дисплазии. Врач в данном случае пишет утвердительно (CIN III) и в срочном порядке отправляет женщину для дальнейшего обследования и лечения (риск развития рака при подобных обстоятельствах составляет 12%).

Онкоцитология шейки матки показывает не только воспалительный процесс и диспластические изменения многослойного плоского эпителия. С помощью цитологического анализа возможно выявление других неопластических процессов и злокачественных опухолей данной области (плоскоклеточный рак, железистая гиперплазия с атипией по типу дисплазии I, II, III, аденокарцинома шейки матки различной степени дифференцировки, лейомиосаркома и пр.), причем по статистике совпадение цитологической расшифровки мазка и заключений гистологии отмечается в 96% случаев.

Воспаление

Хотя задачей цитолога не является просмотр мазка на флору, тем не менее, врач обращает на нее внимание, поскольку флора нередко объясняет причину воспаления и реактивных изменений эпителия. Воспалительный процесс в шейке матки может вызываться любой микрофлорой, поэтому различают неспецифическое и специфическое воспаление.

Неспецифическое воспаление бывает:

• Острым (до 10 дней) – для мазка характерно присутствие большого количества нейтрофильных лейкоцитов;
• Подострым и хроническим, когда в мазке, помимо лейкоцитов, появляются лимфоциты, гистиоциты, макрофаги, в том числе, многоядерные. При этом следует заметить, что просто скопление лейкоцитов нельзя воспринимать, как воспаление.

Цитологическая картина специфического воспаления определяется влиянием специфических возбудителей, попавших в организм и начавших свое развитие в половых органах нового хозяина. Это могут быть:

• Туберкулезная палочка (в мазке – эпителиоидные клетки, клетки Пирогова-Лангерганса, творожистые некротические массы);
• Трихомонады (дистрофические изменения и разрыхление многослойного плоского эпителия, инфильтрация его лейкоцитами). Диагноз трихомонадного кольпита ставится только в случае обнаружения в мазке самих виновников воспаления – трихомонад;
• Сапрофитные грибы рода Candida, вызывающие грибковые поражения, которые в народе называют молочницей;
• Гонококки, являющися причиной гонореи. В мазке – великое множество лейкоцитов, симптом «молчания» (трудно найти хоть какую-то флору), зато как вне клеток, так и внутри их, а также в лейкоцитах явно просматриваются похожие на кофейные зерна диплококки;
• Хламидии, которые вызывают уретриты, цервициты, воспаление тазовых органов. Саму хламидию цитолог в мазке не видит, однако определяет присутствие внутриклеточного паразита наличием в эпителиальных клетках специфических для данного возбудителя включений, называемых тельцами Гальберштедтера-Провачека (тельца «Г-П»);
• Герпетическая инфекция. Она в цитологическом препарате может симулировать диспластические и онкологические процессы – характерное для герпеса изменение клеток (много ядер, расплывчатый хроматин) нередко пугает неопытных цитологов, которые сразу начинают подозревать злокачественный процесс. Подобная цитограмма у беременных заставляет провести дополнительные исследования и является поводом для проведения кесарева сечения (во избежание генерализованной формы герпетической инфекции у новорожденных).

Таким образом, воспаление может быть вызвано присутствием различных возбудителей бактериальной и вирусной природы, которой насчитывается около 40 видов (в качестве примера выше приведены лишь некоторые из них).

Что касается условно-патогенной бактериальной флоры и лейкоцитов, то здесь все дело – в их количестве в каждую фазу цикла. Например, если цитолог явно видит воспалительный тип мазка, а цикл подходит к концу или только начался, то наличие большого количества лейкоцитов никак нельзя рассматривать, как признак воспаления, ведь мазок взят из нестерильной зоны и подобная реактивность всего лишь свидетельствует, что месячные скоро начнутся (или только закончились). Такая же картина наблюдается в период овуляции, когда отходит слизистая пробка (лейкоцитов много, но они маленькие, темненькие, погруженные в слизь). Однако при истинно атрофическом мазке, который характерен для женщин пожилого возраста, присутствие большого количества поверхностных клеток и даже малочисленной флоры уже указывает на воспалительный процесс.

Видео: мазок на онкоцитологию и как его правильно сдавать

Автор старается отвечать на все адекватные вопросы читателей в рамках своей компетенции в пределах ресурса ОнкоЛиб.ру.